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看完本文,领会一下罗丹明123的的染色法式
阅读次数:88宣布日期:2022-09-20
  罗丹明123是一种能够经由过程细胞膜的挑选性染色活细胞线粒体的荧光染料,呈黄绿色荧光。普遍用作检测线粒体膜电位,也经常利用于细胞凋亡检测。它能够疾速经由过程细胞膜,仅需几分钟就能够被具备活性的线粒体所俘获,并且对细胞不任何毒性。
 
  罗丹明123用于对很多种细胞停止染色,包含动物细胞和细菌。因为细胞内ATP的量与Rh123的荧光强度之间有相干性,是以Rh123被利用于检测细胞内的ATP。Rh123还用于癌症研讨。
 
  罗丹明123的染色法式:
 
  (1)将0.4mgRh123消融到1mLDMSO中制备成1mMRh123-DMSO溶液。
 
  (2)用载玻片筹办细胞。细胞数量应为5×104~5×105个/mL。
 
  (3)孵育该载玻片,用PBS或Hank's液洗濯细胞。
 
  (4)用培育基浓缩1mMRh123溶液以制备1~20µMRh123缓冲液。
 
  (5)将Rh123缓冲液插手载玻片并在37℃下孵育30分钟至1小时。
 
  (6)去除Rh123缓冲液并用培育基洗濯细胞(洗濯细胞后为了牢固,插手10%福尔马林缓冲液并孵育15~20分钟,接着用PBS洗濯)。
 
  (7)用带有荧光素滤光片的荧鲜明微镜察看细胞。
 
  贮存前提:室温避光保管,溶于DMSO配制成母液后-20℃保管。