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透析袋的预处置和存储方式
阅读次数:1852宣布日期:2021-05-19

为防干裂,出厂前透析袋通俗都经10%的甘油处置,透析袋中含有微量的硫化物、重金属和一些具备紫外接收的杂质,它们对卵白质和其余生物活性物资无害,用前必须撤除。新购进的通俗型透析袋必须颠末处置能力利用。

一、透析的道理
透析只要要利用公用的半透膜便可实现。凡是是将半透膜制成袋状,将生物大份子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中大份子量的生物份子被扣留在袋内,而盐和小份子物资不时分散透析到袋外,直到袋表里双方的浓度到达均衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“排泄液”或“透析液”。
透析的能源是分散压,分散压是由高出膜双方的浓度梯度构成的。透析的速度反比于膜的厚度,反比于欲透析的小份子溶质在膜表里双方的浓度梯度,还反比于膜的面积和温度,凡是是4℃透析,降低温度可加快透析速度。


二、透析袋的预处置
方式一:
把透析袋剪成恰当长度(10-20cm)的小段。
在大致积(500ml)的2%(w/v)的碳酸氢钠和1mmol/L EDTA2Na(pH=8.0)中将透析袋煮沸10min。
用蒸馏水*洗濯透析袋。
放在500ml的1mmol/L EDTA2Na(pH=8.0)中将之煮沸10min。
冷却后,置于30%或50%的酒精中,放于4℃冰箱,必须确保透析袋一直淹没在溶液内。今后时其取用透析袋必须戴手套。
在利用前要用蒸馏水将透析袋里外加以洗濯清洁。

方式二:
可先用50%乙醇煮沸1h,再顺次用50%乙醇、0.01mol/L碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH=8.0)溶液洗濯,最初用蒸馏水冲刷便可利用。

方式三:
尝试请求不高的能够用简略单纯方式处置。用滚水煮5至10min,再用蒸馏水洗净,便可利用。
不过此刻也有杂质含量少少,无需预处置,只要用去离子水洗濯便可利用的即用型透析袋。这类透析袋具备特别的生物手艺膜,不含硫化物及金属杂质。只是比通俗型透析袋稍贵。

三、三种差别范例的透析袋
通俗型透析袋
1.把透析袋剪成恰当长度(10-20cm)的小段;
2.在大致积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟;
3.用蒸馏水*洗濯透析袋;
4.放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟;
5.冷却后,寄存于4度,必须确保透析袋一直淹没在溶液内。今后时起取用透析袋是必须戴手套;
6.用前在透析袋内装满水而后排挤,将之洗濯清洁;

再生纤维素透析袋:
此范例透析袋可耐受pH规模是2.0~12.0;耐受温度是4~60℃;不能煮,也不须要煮,只要用纯水*冲刷便可。

纤维素透析袋:
此范例透析袋可耐受pH规模是2.0~9.0;耐受温度是4~37℃;不能煮,也不须要煮,只要用纯水*冲刷便可。

 

三、透析袋的挑选
1.肯定透析袋的份子量
在挑选适合扣留份子量之前,起首要明白:欲保留在透析袋中的样品和想要撤除的杂质的份子量。
2.挑选通俗型,再生型,or纤维素透析袋
肯定好份子量以后,按照现实环境,样品溶剂等,挑选透析袋。
3.准确挑选扁平宽度
透析袋扁平宽度的挑选取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快;较大的透析管因分散间隔较长透析较慢。为易于利用,倡议利用总长(包含闭合夹和顶部空间)为约莫10-15cm的透析袋。

 

四、透析袋的利用
下述透析法式是一个遍及的根本透析进程。在起头透析之前招考虑到很多变数。透析样品溶剂、膜的化学相容性、膜的扣留份子量,透析溶剂、透析体积、温度等变量城市影响透析速度,是以,一些利用中下述透析进程能够须要恰当的变更。
1.把恰当的透析液(缓冲液)插手透析装配。透析液的体积应为样品体积量的100倍。(比方:在一升透析液中透析10毫升的样品)
2.裁剪恰当长度的透析管。预留一段额定长度(约占总样品体积量的20%)作为头部空间。
3.把透析管拔出翻开的透析夹,在约超越透析夹3-5毫米的地位再夹住,不要折叠透析袋。
4.由透析管启齿端将样品装入。调剂一下顶部空间的长度,夹紧透析夹。
5.把透析样品放在适合的透析缓冲液中。
6.透析要按照详细的利用须要。凡是环境下,许可留宿透析。在延续透析的进程中,最少要停止3次全数改换透析液。倡议在(透析后)2-4小时,6-8小时和10-14小时(第2天凌晨)改换透析液。在最初一次透析液的改换后要最少持续停止2小时的透析。

 

五、透析袋的存储
1.透析袋不能在纯水中持久贮存,会长菌,用0.05%die氮化钠溶液贮存。
2.样品按保举的单元长度容量加样,不可多加,样品浓度不可太大,不然轻易致使膜涨破。
3.样品和透析液体积比通俗是1:50~500
4.对高浓度净化物,样品能够须要较长的时候透析,透析液须要更频仍的改换。
5.透析温度首要取决于样品。温度限定首要取决于膜的范例。纤维素透析袋能够蒙受的温度高达37℃,再生纤维素透析袋能够蒙受的温度高达60℃。

六、利用注重事变
在恰当的贮存情前提下,保质期为两年。枯燥的透析袋要在室温或4℃贮存在聚y烯袋中。一旦变湿,透析袋应浸泡在以下之一的溶液中:0.05%die氮化钠,1%苯jia酸钠或1%甲醛。(备注:一旦变湿润,不要让透析袋枯燥。不时枯燥会形成孔隙布局不可规复的倾圮)